
研究人员开发了一种基于自动计数金纳米粒子(aunps)的暗场显微镜(dfm)视觉单粒子检测(spd)方案来检测端粒酶活性。该方法首先通过链霉亲和素-生物素相互作用将端粒酶底物(ts)引物连接到磁珠(mb)上。在端粒酶和dntps存在的情况下,用(ttaggg)n重复单元扩增ts引物,形成端粒酶延伸产物(mbs-tep),该产物可以通过au-s键与aunps修饰的互补dna(cdna)杂交(aunps-sh cdna)。在磁分离和dna双链展开后,从上清液中收集aunp,并基于dfm通过目视计数亮点来定量测量端粒酶活性。
